ATP含量測(cè)定的一些問題？
發(fā)布時(shí)間：2014/2/8 10:06:21 瀏覽次數(shù)：3861 [字號(hào)：大 中 小] [關(guān)閉此頁 打印此頁]
每次測(cè)量都是用新的EP管，漩渦混勻器充分混勻。用分光光度計(jì)測(cè)量。比色皿都是經(jīng)過4遍純水沖洗。有5個(gè)問題還請(qǐng)幫我回答一下：
1.由于我們沒有0.5cm光徑的比色皿，所以在加入終止劑后又用蒸餾水對(duì)原液進(jìn)行了4稀釋（吸光度就在1以下了）。這樣可以嗎？
2.你們有沒有出現(xiàn)過測(cè)定管值小于對(duì)照管的現(xiàn)象。
3.體系中加入終止劑后，經(jīng)過稀釋為什么有的體系中會(huì)出現(xiàn)懸浮物？這是怎么回事？
4.顯色應(yīng)用液的配制：顯色劑甲液是7ml/瓶，顯色劑乙液是6ml/瓶。用時(shí)將兩液混勻即可。如果這樣做的話那么總液量是不是就有13ml了？我一次實(shí)驗(yàn)用不了這么多的顯色液，比如只用6.5ml。是不是就取甲液3.5ml、乙液3ml呢？
5.這是試劑盒是不是你們最新推出的產(chǎn)品。穩(wěn)定嗎？
回復(fù)：
1、最終顯色液我們一般不考慮稀釋，雖然理論上都是水相，但是本身ATP含量就比較低，再稀釋更容易出現(xiàn)測(cè)定不出的情況。
2、查批量檢測(cè)記錄有個(gè)別樣本中ATP表達(dá)很低的情況下，會(huì)出現(xiàn)測(cè)定管等于或略小于對(duì)照管的現(xiàn)象。
3、反應(yīng)體系，加終止劑后，沉淀蛋白終止反應(yīng)，所以體系會(huì)出現(xiàn)絮狀物，混勻成渾濁，離心后有沉淀，上清澄清透亮。
4、顯色劑甲乙液，可以根據(jù)需要量吸出后配制，當(dāng)然如果一次性配完后，5天內(nèi)使用沒有問題。
5、ATP含量試劑盒推出不久，由于樣本中表達(dá)不高，顯色劑靈敏度很高，出現(xiàn)誤差也是可能的
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