紅細胞中MDA測定的一些問題？
發(fā)布時間：2014/2/8 9:30:39 瀏覽次數(shù)：5372 [字號：大 中 小] [關閉此頁 打印此頁]
在使用貴公司的MDA測試盒時，遇到了以下問題：
我想測定的是紅細胞中MDA含量，采用的是抽提的方法進行的樣本前處理。那么使用雙蒸水、無水乙醇和三氯甲烷的用量相對紅細胞的體積應是多少呢？是否就是按原說明書上對應的全血的倍數(shù)呢？抽提離心后，有些管中的上清液表現(xiàn)為紅色的渾濁，應該怎么解決呢？如果加NaCl固體，那么其用量為多少呢？另外，我選取了幾個離心效果比較好，測定了最吸光度值，大概都在0.027左右，是不是吸光度有點低呢？我水浴時間已經(jīng)定為80分鐘。還有什么方法能夠提高吸光度值呢？是把紅細胞的用量增加嗎？我實驗室取了50微升的紅細胞。
回復：
MDA測定用提取的方法比較麻煩，一般我們直接用溶血液測定，比較方便！
當然如果要同時測定紅細胞中的SOD，可以考慮提取一份，用于不同指標的檢測！
用紅細胞測定，可以制備成溶血液后再進行提取（如50微升紅細胞，加200微升雙蒸水制成5倍溶血液，無水乙醇和氯仿的量還是按照2倍來加），如果提取的上清不透亮或者是紅色，可以加入一定量的NaCl固體（可以統(tǒng)一每個樣本20mg）。您測得的吸光度確實比較低，如果您不需要測定紅細胞中的SOD，我還是建議老師直接用溶血液檢測MDA！
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