瘤胃樣品做LDH
發(fā)布時(shí)間：2014/2/8 9:02:01 瀏覽次數(shù)：2739 [字號(hào)：大 中 小] [關(guān)閉此頁(yè) 打印此頁(yè)]
說(shuō)明書(shū)中的乳酸脫氫酶樣品是液體，以ml計(jì)算的。我的瘤胃樣品是—80度保存的固體，說(shuō)明書(shū)中混勻是均漿法吧，我應(yīng)用什么規(guī)格的勻漿器，多大轉(zhuǎn)速，在多大的管子中混勻，多長(zhǎng)時(shí)間？另外，蘋(píng)果酸脫氫酶說(shuō)明中有個(gè)最佳濃度的組織勻漿，這代表什么，我還要測(cè)勻漿后濃度嗎，如何測(cè)？應(yīng)用什么規(guī)格的勻漿器，多大轉(zhuǎn)速，在多大的管子中混勻，多長(zhǎng)時(shí)間？請(qǐng)您盡快回復(fù)，我好按您的指導(dǎo)進(jìn)行測(cè)定。謝謝！還有酶標(biāo)法48T是什么意思，是一個(gè)板子48個(gè)空嗎
回復(fù)：
LDH和MDH測(cè)定的樣本都需要制備成液體！老師的樣本是冷凍保存的固體組織，測(cè)定之前需要將其制備勻漿，離心取上清后進(jìn)行測(cè)定！對(duì)固體組織勻漿我們用的是組織高速分散器，一般準(zhǔn)確稱(chēng)取50-150mg組織，按照重量體積比1:9加入9倍體積的生理鹽水，勻漿！說(shuō)明書(shū)操作表中的混勻，是指在漩渦混勻器上使得樣本和試劑充分混勻，不是勻漿！
MDH批量檢測(cè)之前，需要將１０％組織勻漿稀釋成不同濃度，做預(yù)實(shí)驗(yàn)，要求就按照說(shuō)明書(shū)上提到的△OD在0.05-0.3之間！選擇最佳的勻漿濃度進(jìn)行批量實(shí)驗(yàn)！
當(dāng)然測(cè)定組織中這２個(gè)酶活性指標(biāo)，我們建議同時(shí)需要測(cè)定勻漿中的總蛋白濃度！
微板法試劑盒，規(guī)格上面提到的48T，就是能檢測(cè)48個(gè)樣本！
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